丝袜 亚洲 另类 国产 制服 I 一本丁香综合久久久久不卡网站 I 韩日美无码精品无码 I 日韩精品中文字幕无码一区 I 亚洲精品国产一区二区精华液 I 一区二区成人在线 I 农村妇女一区二区 I 老头边吃奶边弄进去呻吟 I 国产毛片不卡 I 亚洲久久天堂 I 久久999精品国产只有精品 I 天天干在线观看 I 久久1024 I 国产精品无码av一区二区三区 I 中文字幕人妻被公上司喝醉在线 I 欧美中文字幕第一页 I av无码精品一区二区三区三级 I 日韩久久影院 I 国产a∨国片精品青草视频 I 偷偷在线观看免费高清av I 亚洲女同吃奶 I 伊人亚洲天堂 I 国产88av I 国产亚洲色视频在线 I 欧美日韩精品在线观看视频 I 欧美jiizzhd精品欧美 I 亚洲国产成人高清在线播放 I 自拍偷区亚洲综合美利坚 I 久久99国产精品久久99果冻传媒 I 成人在线看片

　　elisa試劑盒操作方法、ELISA測定出現問題及解決

　　雙抗體夾心法

　　1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　間接法

　　1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜;

　　2.次日洗滌3次;

　　3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;

　　4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;

　　5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌;

　　6.’最后一遍用DDW洗滌。

　　其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

　　ELISA測定中可能會出現的問題及可能的原因：

　　可能的原因(非試劑盒本身的原因)

　　1.弱陽性質控樣本檢測不出 溫育的時間或溫度不夠;顯色反應時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題

　　2.測定的重復性差 (相同樣本兩次測定結果不一致) 這是典型的由測定操作引起的問題，包括

　　(1)加樣本及試劑量不準;孔間不一致;

　　(2)加樣過快，孔間發生污染;

　　(3)加錯樣本;

　　(4)加樣本及試劑時，加在孔壁上部非包被區;

　　(5)不同批號試劑盒中組分混用;

　　(6)溫育時間、洗板、顯色時間不一致;

　　(7)孔內污染雜物;

　　(8)酶標儀濾光片不正確;

　　(9)血清標本未凝固即加入，反應孔內出現纖維蛋白凝固或殘留血細胞，易出現假陽性反應等。

　　3.白板 (陽性對照不顯色)

　　(1)漏加酶結合物;

　　(2)洗板液配制中出現問題，如量筒不干凈，含酶抑制物(如疊氮鈉)等。

　　(3)漏加顯色劑A或B;

　　(4)終止劑當顯色劑使用。

　　4.全部板孔均有顯色

　　(1)洗板不干凈;

　　(2)顯色液變質;

　　(3)加底物的吸光受酶污染;

　　(4)洗板液受酶等污染

　　Elisa試劑盒 本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。